【SN商检标准】 古氏短体线虫检疫鉴定方法

SN
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4408—2015
古氏短体线虫检疫鉴定方法
Detection and identification of Pratylenchus goodeyi2015-12-04发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2016-07-01实施
发布
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4408—2015
本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国南通出入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国湖北出人境检验检疫局。
本标准主要起草人：葛建军、王旭、熊玉芬、王金成、张明、李芳荣、王振华。1范围
古氏短体线虫检疫鉴定方法
本标准规定了古氏短体线虫的检疫鉴定方法。SN/T4408—2015
本标准适用于进出境植物苗木及携带土壤、植物栽培介质中的古氏短体线虫检疫鉴定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T24831—2009香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法SN/T2122—2008进出境植物及植物产品检疫抽样3古氏短体线虫基本信息
学名：PratylenchusgoodeyiSher&Allen，1953异名：AnguillulinamusicolaGooy.1932;T
enchusmusid
olaiGoodey,1928
分类地位：线虫门Nematoda，侧尾腺纲Secernentea，垫刃目Tylenchida，垫刃亚目Tylenchina，短体科Pratylenchidae，短体属Pratylenchus
古氏短体线虫其他相关信息
4方法原理
见附
古氏短体线虫雌雄虫的形态学特征、寄主范围、地理分布和生物学特性（参见附录A）是种类鉴定的主要依据。
5
仪器设备、器具和试剂
5.1
仪器设备
生物显微镜、体视显微镜（具透射光源）、加热板、水浴锅。5.2器具
自封袋、钟面皿或培养血、载玻片、盖玻片、网筛（20目、100目、500目）、烧杯（500mL、1000mL）、漏斗、漏斗架、乳胶管或硅胶管、止水夹、小镊子、剪刀、挑针、浅盘、线虫滤纸、酒精灯、干燥器、试管。5.3试剂
4%甲醛、指甲油、甘油、无水乙醇、石蜡。SN/T4408—2015
6现场检查
将其主要寄主植物（参见附录A)作为现场检查重要的对象。对植物种苗的生长状况、根及根茎部进行仔细的检查，注意观察其根部是否有变褐和坏死等症状重点收集上述可疑的植物材料及所夹带的土壤或栽培介质等，如无可疑症状则按要求随机取样，送实验室进行古氏短体线虫的检验。具体抽样方法见SN/T2122—2008中5.5。7实验室检验
7.1线虫的分离
具体的分离方法见GB/T24831—2009中附录A。7.2体视显微镜镜检
将分离获得的线虫样品放在体视显微镜下检查。古氏短体线虫虫体较小，头低平，口针明显。挑取线虫若干条制成临时玻片或永久玻片在生物显微镜下观察线虫形态。具体玻片标本制作方法见GB/T24831一2009中附录C。3生物显微镜镜检和测计
7.3
在生物显微镜下观察线虫的形态结构，对其主要鉴定特征进行重点观察、拍摄、测量和计算。线虫样品充足时，应观察并测量雌雄虫各20条以上。3形态鉴定特征
8
短体线虫属形态鉴定特征
8.1
8.1.1雌虫
雌虫形态鉴定特征如下，
虫体粗短，体长小于1mm，a=20~30；头部低平，连续到略缢缩，头架骨化显著；口针粗短，基部球发达；
单生殖腺、前伸，有后阴子宫囊；尾长是肛门处体宽的2倍～3倍，尾端圆、钝（很少尖）。8.1.2雄虫
雄虫形态鉴定特征如下：
整体形态与雌虫相似；
单个精巢，前伸；
一交合刺弯曲呈弓形，引带不伸出泄殖腔，交合伞延伸至尾端8.2古氏短体线虫形态鉴定特征
8.2.1测计值
古氏短体线虫的测计数据见表1。2
测计
项目
L/mm
a
6
6
c
2
V
St./μm
Sp./μm
Gub./μm
注：n-
表1
来自香蕉（Sher，1953）
古氏短体线虫测计值一览表
来自芭蕉
(Ryss,1988)
早（n=10）
0.64~0.68
27~37
5.5~6.1
16~18
73~75
17
0.55~0.57
26
5.4~5.8
1718
16
0.40~0.56
2434
5.5~6.5
3.8~4.7
14~18
2.5~3.0
73~75
14~15
含（n=10)
0.40~0.51
2537
5.8~6.6
3.9~4.9
20~25
15~16
5~6
来自大蕉（Sakwe&
Geraert,1994)
早（n=13）
0.43~0.61
21.7~28.8
5.4~7.7
3.7~4.8
14.7~18.5
1.72.8
72~78
14.5~16.5
含（n=4）
0.47~0.65
22.8~29.2
5.9~7.1
3.85.1
15.2~19.4
1.9~2.4
13.0~15.5
SN/T4408-2015
来自香蕉（Troccoli
等，1996）
早（n=15）
0.490.71
19.7~29.5
4.1~8.1
2.9~5.3
13.8~20.0
1.9~3.2
73~79
15.5~17.5
含(n=10）
0.38~0.53
24.0~31.7
5.87.3
3.9~4.6
12.5~17.2
2.43.3
13.5~15.5
虫体体长；a一体长/最大体宽；b——一体长/虫体前端至食道与肠连接处测量的线虫标本数目；L——
的距离;6-
针长度：Sp.
2形态描述
8.2.2
8.2.2.1
雌虫
雌虫形态如下：
体长/虫体前端至食道腺末端的距离：c—体长/尾长c—一尾长/肛门处体宽；St.—交合刺长：Gub.-
引带长度：V-
虫体前端至阴门的距离×100/体长。虫体长0.4mm~0.7mm，a值在19~37之间；头部低，不继缩或稍缩，头架骨化显著；口针长16um18um，口针基球前缘较平；侧区4条侧线，不明显，侧区外侧2条侧带有网纹：唇环4个，中食道球卵圆形；
单生殖腺，后阴子宫囊长等于体宽；受精囊大，亚长方形，充满精子；尾为圆锥形，尾端稍靠前处背部轮廊类似波浪状向腹面凹陷；尾腹面尾环数为22个～24个；
侧尾腺孔明显，距尾末端10个～14个体环。8.2.2.2
雄虫
雄虫形态如下：
整体形态与雌虫相似；
交合刺弯曲，呈弓形；
引带简单；
交合伞延伸至尾端。
口
SN/T4408-2015
古氏短体线虫的形态特征描述图见附录B。9结果判定
符合8.2形态鉴定特征以及测计值的可鉴定为古氏短体线虫。鉴定过程中应重点注意该线虫与其相似种的形态差异（参见附录C)。10样品和资料保存
样品保存与处理
10.1
样品经登记和经手人签字后
妥善保存。对已鉴定出古氏短体线虫的样品应置于密封塑料袋中保存人备复核、谈判和仲裁
于4℃冰箱，至少保存3个月，以10.2
线虫保存与处理
从检测样品中分离并鉴定为古氏短体线虫的线虫材料，应妥善保存。将剩余的线虫杀死、固定后制成永久玻片标本保存，也可用4%甲醛固定后长期保存。标本标签中应写明样品编号、种名、制作时间、制作人、寄主、产地等信息。
10.3
资料保存与处理
完整的原始实验记录包括：样品的实验的时间、地点、方法和结果等。检测报告要有实验人员和审核人员签字。全部资料归档，妥善保管，以备复核、谈判和仲裁。S
A.1寄主范围
附录A
（资料性附录）
古氏短体线虫的其他相关信息
SN/T4408—2015
古氏短体线虫主要危害香蕉，还可以侵染玉米、高粱、马铃薯、菜豆、番茄、黄杨、葡萄、柑橘属、香蕉、芭蕉、番茄、草莓、银合欢、饭包草等古氏短体线虫的寄主较为广泛，很多信息尚未明确。因此，现场检疫时不应仅限于检查上述明确指出的植物种类。
2地理分布
A.2
在英国、澳大利亚、乌干达、西班牙、葡萄牙、喀麦隆、埃塞俄比亚、科特迪瓦、肯尼亚、坦桑尼亚、希腊、俄罗斯均有报道。
一些研究表明古氏短体线虫在非洲很多国家均有分布，包括高海拔的、较为寒冷的地区，因此认为该线虫为非洲本地种（Price&Bridge1995）。A.3生物学特性
古氏短体线虫主要通过带根的
苗本
壤及裁培介质进行远距离的传播。移性内寄
生线虫
，以幼虫
和成虫危害寄主植物，症状如下：古氏短体线虫是一种根部迁
线虫一般穿刺根表皮进人皮层
在根的外部形
成多个棕红色的
斑痕，斑痕下有线虫取食形成的小洞，内有线虫和卵；接着取食范围扩
大，斑痕融合，根的皮层
组织受损，功能严重削弱。古氏短体线虫一般不危害根部中柱
坏死。
，但有利于其他植物病原的侵染。最终造成根中柱受损，根末梢
香蕉根部受侵害可造成植株生长缓慢、矮化甚至倒到伏，可造成香蕉大量减产。
由于古氏短体线虫危害造成的损失与香蕉穿孔线虫相似，在南非和加纳，严重危害时可导致减产60%；在坦桑尼亚危害94%的香蕉农场，严重时导致减产85.9已报道短体属线虫的有效种共有76种，古氏短体线虫属于70个非中国种中对植物生长危害较大的种类之一。
5
SN/T4408—2015
附录B
（规范性附录）
古氏短体线虫的形态特征图
古氏短体线虫的形态特征图见图B.1。50um
说明：
A
B
c
D.E
6
雌虫前部；
雌虫头部；
雄虫头部；
雄虫尾部：
F~
K
雌虫尾部；
雌虫生殖腺；
雌虫。
古氏短体线虫形态特征（A-K仿MachonandHunt，1985）图B.1
附录C
（资料性附录）
古氏短体线虫与近似种及其他常见短体线虫的区别SN/T4408—2015
短体属线虫中古氏短体线虫与表C.1中的短体线虫种的形态极为相似，是鉴定时容易混淆的线虫，要注意种类间的区别。
表c.1
种名
P.goodeyi
古氏短体线虫
P.morettoi
莫氏短体线虫
P.typicus
典型短体线虫
P.coffeae
咖啡短体线虫
P.penetrans
穿刺短体线虫
P.pratensis
草地短体线虫
P.scribneri
斯氏短体线虫免费标准bzxz.net
P.vulnus
伤残短体线虫
P.zeae
玉米短体线虫
P.fallar
虚假短体线虫
P.loosi
卢斯短体线虫
P.neglectus
落选短体线虫
P.brachyurus
短尾短体线虫
唇
环
4
4
2
3
3，
4
3
2
2,
口针长/
μm
16~18
1419
15~17
15~18
15~17
12~15
12~15
16~18
15~17
16~17
14~18
古氏短体线虫与近似种及其他常见短体线虫的区别形态特征
食道腺
覆盖长
度/μm
30～40
25
2040
45~54
V值
%
73~75
73~80
79~84
7683
75~84
76~80
74~79
78~84
68~76
76~82
79~85
15193032.57688
17~22
82~89
刻
线
数
4
4，
5，
6
后阴子宫
囊长/μm
等于阴门处
体宽
46~74
长于2倍阴
门体宽
17~50
1倍～1.5倍
阴门处体宽
1.6倍～2.7
倍阴门处
体宽
1.5倍阴门
处体宽
2倍阴门处
体宽
1倍～2倍
阴门处体宽
1倍～1.5倍
阴门处体宽
肛阴距的
30%~50%
10~30
授精囊
形状
亚长方形
圆形
长方形
卵形或近
圆形
圆形
长方形或卵
圆形
卵圆形或近
圆形
长方形
圆形
圆形
卵形
退化
不明显
尾形
圆锥形
圆锥形
圆锥形
圆锥形
亚圆柱形或
圆锥形
亚圆柱形或
圆锥形
圆锥形
近圆柱形
圆锥形
圆锥形或亚
圆柱形
宽圆锥形
尾端形态
背侧波浪状
腹侧凹陷
变化较多，
末端表皮厚
圆而光滑
钝圆
无纹
圆形
无纹
钝尖或圆
腹面稍长
无纹
窄圆或稍尖
末端较尖
无环纹
钝圆
光滑无纹
钝或尖
无纹
光滑、宽圆、
平截或匙形
雄虫
有无
有
有
无
有
有
有
有
家
有
有
有
无
有

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